通用型细胞治疗是肿瘤免疫细胞治疗的一个新趋势，使得免疫细胞产品能够工业化量产，更像是药物，给普通患者带来便利。当然，除了普适性的细胞治疗产品之外，另一方面，更加“个性化”的肿瘤细胞治疗亦有需求，因为一种药物没有办法治疗所有病人，尤其是肿瘤这样高度异质性的病变。通用的细胞免疫治疗往往只针对特定的肿瘤抗原靶点，而放弃了肿瘤抗原类型不匹配的患者，那么为这类患者专门提供的更加个体化的疗法，即是“个性化”治疗的“高端”之所在。

       个性化治疗需要详细的掌握肿瘤患者自身的免疫系统的状况，特别是对T细胞状态的表征和把控。于是，有关于“T细胞受体库”的研究受到越来越多肿瘤免疫治疗工作者的重视。

T细胞发育过程中的基因重排与TCR受体库

       TCR是T细胞表面识别抗原，产生免疫应答的关键分子，以非共价键与CD3结合，形成复合物。TCR本身是由α链和β链（αβ-T细胞）或者γ链和δ 链（γδ-T细胞）构成的异二聚体。以外周血中占比90%以上的αβ-T细胞为例，这两条链均由可变区（V区）、恒定区（C区）、跨膜区、胞质区构成。因为可变区的高度多样性，赋予了TCR具有几乎无限的抗原识别和应答能力，包括识别并杀伤肿瘤，保护我们的机体。然而编码具有如此强大多样性TCR的基因，并非初始就存在，而是随着T细胞发育，经过基因重排之后形成的。

       经典的克隆选择学说认为：初始T细胞在胸腺皮质和髓质处，经过阳性选择和阴性选择最终成熟。TCR是在胚系基因的基础上，在胸腺中经过V、D、J、C基因片段重排，以及重排连接处核苷酸的插入、剪接、缺失等突变之后，形成了多样性的抗原互补决定区（CDR1、CDR2、 CDR3），即V区的3个高变区。CDR1和CDR2是由V基因编码的，是TCR与MHC复合体相互作用所必需的。CDR3是由V和J连接（α链）或者V、D和J连接（β链）的一段区域构成，直接于抗原肽结合，因此具有高度多样性。CDR3因此也被认为是决定T细胞克隆类型的区域。

      TCR的多样性极其丰富，可达10的15次方种，所以机体才有可能识别几乎任何抗原。个体的T细胞的所含有的TCR总数称为一个T细胞受体库（TCR repertoire或者TCR profile）。正常个体在没有抗原刺激的情况下，TCR基因重排是随机的，T细胞呈多家族、多克隆性特点。接受不同抗原刺激后，TCR的V区基因可对抗原产生特异性识别，并使带有这类基因的T细胞得到优势扩增。这也是为什么科学家们在癌症免疫治疗研究中，对TCR库的状态越来越感兴趣的原因。

TCR受体库测序的选择与分析

       TCR受体库的检测分析，传统的方法有PCR-DNA印记法、PCR-ELISA法、荧光示踪法等。随着测序技术的发展，二代高通量测序法成为TCR受体库研究的主流。目前提供TCR受体库测序的主流公司有华大基因、Adaptive Biotechnologies等。服务包括对基因组DNA或者RNA的高通量测序，通过多重PCR或是5’RACE加巢式PCR等方法构建测序文库，进而测序获得CDR3区域，或者包括CDR1和CDR2在内的更长区域的海量数据结果。

       关于测序目标的选择，β链是主要的研究对象，由于它在组成上多了一个D基因，具有更高的复杂度和多样性。CDR3区域由于与抗原肽直接作用，直接决定TCR的特异性，所以是首选。而CDR1和CDR2由于与抗原没有直接相互作用，研究用到的不多。不过CDR1和CDR2在与MHC分子的接触中发挥作用，所以在研究TCR结合敏感性和亲和力等相关领域有借鉴意义。要注意的是，并不是所有的方法都能够检测CDR1和CDR2，比如多重PCR法建库的时候，等位基因特异性引物被设计在V基因的不同位置，则只能进行CDR3区域的测序。

       TCR库测序结果的分析主要有：V、D、J基因片段使用频率，CDR3 长度，插入及缺失碱基比例、CDR3氨基酸使用模式，不同抗原受体序列丰度及文库的多样性、克隆性等。尤其是表达量超过了总 CDR3 序列的 0.5％高克隆序列（Highly enpended clone， HEC），往往反映了肿瘤患者免疫系统对机体肿瘤抗原的应激状态，对个体化肿瘤免疫细胞治疗中的新抗原发现，治疗监测及预后跟踪的研究发挥关键作用。